از این تست برای تشخیص وجود خون در مدفوع که می تواند به علت های مختلف در مدفوع دیده شود را انجام می دهیم . بعد از انتخاب نمونه هایی که نیازمند تست OB هستند به شرح زیرعمل می کنیم : ابتدا در یک لوله ازمایش 1 سی سی آب مقطر ریخته و سپس مقداری از نمونه مدفوع را توسط اپلیکاتور برداشته و به لوله انتقال می دهیم . پس از حل کردن ومخلوط کردن نمونه مدفوع در آب مقطر 4 قطره اسید اسیتیک به آن اضافه می کنیم . سپس پیرامیدون را به اندازه دو قطره چکان کامل به آرامی و از کناره دیواره به سوسپانسین تهیه شده اضافه می کنیم . بعد چهار قطره آب اکسیژنه را  به لوله اضافه می کنیم . اب اکسیزنه را هم باید مانند  پیرامیدون به آرامی واز کنار دیواره اضافه کنیم . پس از تهیه سوسپانسیون فوق لوله آزمایش را با کمترین حرکت ممکن برداشته و با کمک یک زمینه سفید وجود حلقه بنفش را در ان بررسی کنیم اگر حلقه ی بنفشی در لوله ایجاد شود نشان دهنده این است که نمونه مدفوع ما دارای خون مخفی است در غیر این صورت نشان دهنده منفی بودن خون مخفی خواهد بود .

 چند نکته :

  • مصرف گوشت تست OB را به صورت کاذب مثبت می کند .
  • اگر فرد بیمار از ويتامينc استفاده كند ممكن است تست OB به صورت كاذب منفي شود .
  • اگر فرد  بیمارخون ريزي از لثه ها داشته باشد بايد به او هشدار داد كه از 24 ساعت قبل از مسواك زدن خودداري كند .
  • برای برداشتن نمونه در تست OB باید اپلیکاتور را به تمام قسمت های نمونه مخصوصاْ بخش های خونی و سیاه رنگ آغشته کنیم .